商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | NCI-H295R人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞細(xì)胞系 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號(hào) | E1934 | 種屬 | 人 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁細(xì)胞 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
商品詳情：
別稱 NCI H295R; NCIH295R; H295R; H-295R; H295R-S1
種屬 人類
年齡（性別） 48歲
組織來源 器官：腎上腺
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
背景描述 NCI-H295R細(xì)胞是源于多能腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞系NCI-H295細(xì)胞，后者由Gazdar·A·F等建立，從腎上腺皮質(zhì)的腫瘤中分離而來。NCI-H295細(xì)胞經(jīng)改變培養(yǎng)條件獲得了NCI-295R細(xì)胞，群體倍增時(shí)間從原來的5天減為2天。NCI-295細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)，而NCI-H295R細(xì)胞呈單層貼壁生長(zhǎng)。NCI-H295R細(xì)胞保留了產(chǎn)生雄激素的能力，對(duì)血管緊張素Ⅱ和鉀離子有反應(yīng)。
生物安全等級(jí) 1
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 DMEM/F12＋I(xiàn)TS-G（PB180429）＋10% FBS＋1% P/S(PB180120）
推薦傳代比例 1:2-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
基因表達(dá)情況 aldosterone; cortisol; C19 steroids
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-2128
細(xì)胞系培養(yǎng)步驟：
細(xì)胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞傳代和細(xì)胞凍存。
細(xì)胞復(fù)蘇?：
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。
將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代?：
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DME培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
?細(xì)胞凍存?：
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細(xì)胞的生長(zhǎng)和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴(kuò)展，為科學(xué)研究提供了大量的細(xì)胞樣本?。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞傳代和細(xì)胞凍存。
細(xì)胞復(fù)蘇?：
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。
將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代?：
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞凍存?：
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細(xì)胞的生長(zhǎng)和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴(kuò)展，為科學(xué)研究提供了大量的細(xì)胞樣本
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細(xì)胞接收后的處理：
1）NCI-H295R人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞細(xì)胞系收到細(xì)胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠直腸平滑肌細(xì)胞 | 人zi宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞 |
人牙髓干細(xì)胞 | 小鼠甲狀旁腺細(xì)胞 |
人牙齦干細(xì)胞 | 小鼠zi宮微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
人牙齦上皮細(xì)胞 | 人肺動(dòng)脈高壓血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
人口腔黏膜上皮細(xì)胞 | 人腮腺腫瘤細(xì)胞 |
人牙齦成纖維細(xì)胞 | 人腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞 |
人角膜上皮細(xì)胞 | 小鼠肺巨噬細(xì)胞 |
人晶狀體上皮細(xì)胞 | 小鼠甲狀腺成纖維細(xì)胞 |
人脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 牛小腸黏膜上皮細(xì)胞 |
人角膜內(nèi)皮細(xì)胞 | 人扁桃體成纖維細(xì)胞 |
人舌表皮細(xì)胞 | 小鼠主動(dòng)脈弓內(nèi)皮細(xì)胞 |
人視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞 | 小鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
人脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞 | 大鼠肺巨噬細(xì)胞 |
人視網(wǎng)膜muller細(xì)胞 | 牛骨骼肌細(xì)胞 |
人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 |
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