產(chǎn)品介紹
MCDB 131 培養(yǎng)基起初是由 Knedler 和 Ham 開(kāi)發(fā)的，用作培養(yǎng)人微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (HMVEC) 的減血清補(bǔ)充培養(yǎng)基。MCDB 131 培養(yǎng)基也可配合其他細(xì)胞類(lèi)型使用，包括人網(wǎng)膜微血管細(xì)胞、肝細(xì)胞、肌細(xì)胞以及平滑肌細(xì)胞。
MCDB 131 的使用
MCDB 131 培養(yǎng)基內(nèi)含傳統(tǒng)基礎(chǔ)培養(yǎng)基中不存在的許多組分，例如痕量元素、腐胺、腺嘌呤、胸苷以及更高水平的某些氨基酸和維生素。添加這些成分后，只需在培養(yǎng)基中補(bǔ)充極少量的血清或成分明確的組分。
MCDB 131 培養(yǎng)基不含蛋白或生長(zhǎng)因子，通常需要補(bǔ)充 EGF、谷氨酰an和少量胎牛血清 (FBS)。必須針對(duì)每種細(xì)胞類(lèi)型優(yōu)化 FBS 濃度。MCDB 131 培養(yǎng)基使用碳酸氫na緩沖系統(tǒng) (1.176 g/L)，因此需要 5–10% CO2 環(huán)境來(lái)維持生理 pH 值。
培養(yǎng)基主要成份表
（+） 酚 紅
（+） 丙酮酸鈉
（+） 低糖（1.0g/L)
運(yùn)輸和保存
放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸（儲(chǔ)存條件2-8℃ 避光儲(chǔ)存）產(chǎn)品保質(zhì)期12個(gè)月。
產(chǎn)品名稱(chēng) | MCDB131 （低糖）培養(yǎng)基 |
貨號(hào) | EY-XP4256 |
規(guī)格 | 500ml |
技術(shù)服務(wù) | 免費(fèi)技術(shù)支持 |
用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來(lái)水沖洗即可。
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用 Countess®自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低 1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
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1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
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